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小鼠皮下成瘤模型构建、给药方案、瘤体积测量与取材规范


免疫缺陷裸鼠皮下移植瘤模型操作门槛适中、观察直观,是抗肿瘤候选药物体内初步药效评价最主流模型。本文从细胞制备、接种操作、瘤体积测量、分组给药、终点取材标准化方案展开,总结建模难点。

皮下成瘤模型,将肿瘤细胞悬液接种于 BALB/c nude 裸鼠背部皮下,肿瘤原位生长,定期记录瘤径、体重,评估药物对肿瘤生长的抑制效果,适合小分子、多肽、纳米制剂、抗体药物初筛。


一、造模前准备

  1. 细胞:对数生长期肿瘤细胞,消化、PBS 重悬,调整合适细胞浓度,保证细胞活率>90%;细胞悬液冰上放置,减少凋亡;

  2. 动物:4–6 周龄裸鼠,适应饲养环境至少 3–5 天;裸鼠 SPF 级饲养,严格无菌,免疫力缺失极易感染。


裸鼠皮下成瘤模型,肿瘤组织测量与样本取材


二、接种操作

接种部位:背部靠近后肢皮下(血供丰富,成瘤率更高);每只裸鼠皮下缓慢注射细胞悬液,注射后停留几秒拔针,防止漏液;接种后定期观察,一般 7–14 天陆续长出肉眼可见肿瘤。 当瘤体积达到 100–150mm³ 左右,按照瘤体积随机分组,减少组间基线差异(随机分组是审稿重点)。


三、给药与瘤体监测

给药方式:尾静脉注射、腹腔注射、灌胃、瘤内注射,根据药物特性选择; 瘤体积计算公式:V = 长径 × 短径 ²/2;2–3 天测量一次,同步记录裸鼠体重,评估药物系统毒性; 终点判定:肿瘤体积上限、动物体重下降阈值,遵循动物伦理规范。


四、取材与后续检测

终点麻醉处死,剥离完整肿瘤组织,一部分固定做 HE、免疫组化;一部分液氮速冻,用于 qPCR、WB、流式检测肿瘤组织蛋白、基因变化。


五、常见失败问题

  1. 不成瘤:细胞活力差、接种细胞数量不足、漏液;

  2. 成瘤差异极大:细胞悬液混匀差、接种深度不一致;

  3. 裸鼠批量死亡:饲养污染、药物毒性过大、操作感染。


六、研录生物服务

研录生物 SPF 动物平台支持裸鼠皮下成瘤模型构建、长期代养、尾静脉给药、瘤体测量、取材包埋、免疫组化等一体化药效外包;同时支持原位瘤、转移瘤等复杂肿瘤模型方案沟通。

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