UUO 单侧输尿管梗阻肾纤维化模型构建与评价体系

梗阻性肾病是临床常见肾脏损伤类型，尿路梗阻持续存在会逐步诱发肾小管萎缩、间质炎症浸润、成纤维细胞活化、胶原大量沉积，最终进展为不可逆肾纤维化。UUO 单侧输尿管梗阻模型是肾脏领域使用最多的体内模型，对比 CCl4、BDL 等肝纤维化模型，UUO 造模周期短、纤维化表型稳定、重复性好，是研究 TGF-β/Smad、炎症 - 纤维化通路和筛选抗纤维化药物的首选模型。

一、UUO 模型造模原理

手术结扎单侧输尿管，造成上尿路完全梗阻，肾盂内压力升高，肾小管上皮细胞损伤坏死，释放大量促纤维化因子，招募巨噬细胞浸润，诱导肌成纤维细胞增殖，肾间质逐步堆积 Ⅰ、Ⅲ 型胶原。 时间线参考：

• 术后 3d：早期炎症，肾小管损伤

• 术后 7d：间质胶原开始沉积

• 术后 14d：明显肾纤维化（最常用取材点）

• 术后 21d：重度纤维化、肾脏萎缩

对照组设置假手术组：只开腹游离输尿管，不结扎、不剪断输尿管，其余操作完全一致，排除开腹手术本身带来的炎症干扰。

二、小鼠 UUO 标准手术步骤

1. 动物选择：C57BL/6 小鼠，6–8 周龄，雌雄按需选择，术前禁食不禁水 6–8h；

2. 麻醉固定，背部或者腹侧切口，碘伏消毒；

3. 逐层分离腹腔组织，找到单侧输尿管（左侧输尿管最常用）；

4. 避开肾脏血管，在肾盂远端位置，丝线双重结扎输尿管，两道结扎中间剪断；

5. 确认无渗血、输尿管结扎牢靠，将脏器复位回腹腔；

6. 分层缝合腹膜、皮肤，术后保温复苏，可适当镇痛；

7. 正常饲养，按预设时间点取材。

重点避坑：结扎位置不要离肾脏太近，容易损伤肾门血管，造成肾脏急性坏死，不是间质纤维化表型。

三、UUO 模型评价体系

四、高频失败问题与解决方案

五、实验设计建议

1. 药物干预分两种方案：预防给药（造模当天开始给药）、治疗给药（造模 7d 纤维化启动后给药）；

2. 样本分配：一侧梗阻肾固定做病理，另一侧冻存用于 RNA、蛋白提取；血清留作生化；

3. 样本量：每组 8–10 只，UUO 术后存在一定死亡率，建议多预留 20% 备用动物；

4. 取材操作速度要快，肾脏组织极易降解，离体后快速固定或者液氮速冻。

研录生物可提供UUO 单侧输尿管梗阻肾纤维化动物模型构建服务，配套肾脏病理染色、生化检测、qPCR/WB 分子检测一站式服务，支持肾脏纤维化课题药效评价。