UUO 肾纤维化模型构建要点、鉴定指标与常见失败原因

慢性肾脏疾病（CKD）伴随持续性肾间质纤维化，是终末期肾病重要诱因，UUO 单侧输尿管梗阻模型因造模周期适中、纤维化表型稳定、重复性好，在肾脏药理、炎症、纤维化相关课题中应用极广，也是很多国自然、硕博课题首选体内模型。

一、UUO 模型原理

通过手术结扎单侧输尿管，造成尿路梗阻、肾盂积水，肾小管上皮损伤、炎症细胞浸润，逐步诱导肾小管间质纤维化，对侧肾脏作为自身对照，可区分梗阻诱导的继发性病理改变，适合探究纤维化信号通路、肾保护药物药效评价。常用实验动物为 SD 大鼠、C57BL/6 小鼠，大鼠操作视野更大，新手建模成功率更高。

二、标准化造模流程

1. 动物术前准备：大鼠术前禁食不禁水 8–12h，称重，麻醉（戊巴比妥或异氟烷吸入麻醉），备皮消毒；

2. 切口与分离：背部侧切口，逐层分离皮下、肌层，找到输尿管上段，避开肾脏血管；

3. 结扎操作：双线结扎输尿管，两道结扎间距 2–3mm，部分方案会在两道结扎中间剪断输尿管，降低再通风险；假手术组只分离输尿管，不结扎；

4. 逐层缝合肌肉、皮肤，碘伏消毒创口，术后保温复苏。

重点提醒：输尿管结扎位置不能太靠近肾脏，容易损伤肾门血管，引发肾脏坏死、动物提前死亡。

三、取材与鉴定指标（课题审稿重点）

1. 大体观察：梗阻侧肾脏肿大、肾盂扩张积水，肾脏皮质变薄；

2. 组织病理：HE 染色看肾小管扩张、炎性浸润；Masson 染色评估胶原沉积、纤维化程度；

3. 分子指标：TGF-β1、α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ 等纤维化相关基因 qPCR、蛋白 WB 验证；

4. 肾功能：血清肌酐、尿素氮辅助参考（UUO 单侧梗阻，肾功能指标变化幅度有限，不作为核心判定）。

四、高频失败原因和解决办法

1. 输尿管结扎不全 / 滑脱：术后尿路再通，无纤维化表型；对策：双线牢固结扎，建议剪断输尿管；

2. 术中大出血：分离时误伤肾动脉；对策：轻柔钝性分离，看清输尿管走行再操作；

3. 术后感染、创口开裂：无菌操作不到位；对策：术中无菌，术后可根据方案选择抗感染处理；

4. 动物批量死亡：麻醉剂量超标、保温不足；异氟烷吸入麻醉可控性优于戊巴比妥。

五、研录生物配套服务

如果实验室条件有限、动物建模成功率低，研录生物可承接 UUO 肾纤维化模型构建、饲养、取材、组织包埋切片、染色、qPCR、WB 全套检测外包，同步提供动物代养、标本送检，支持按照客户课题方案定制造模参数，配套提供纤维化检测相关试剂盒。