CLP 盲肠结扎穿刺脓毒症模型构建与评价规范

脓毒症是感染诱发的危及生命的全身炎症反应综合征，临床死亡率高。CLP（Cecal Ligation and Puncture，盲肠结扎穿刺）模型是目前学术界公认最贴近临床自发性腹腔感染脓毒症的动物模型，区别于 LPS 单次急性炎症模型，CLP 是持续菌血症、逐步进展的炎症损伤。

一、CLP 造模分级（核心控制点）

模型轻重由结扎盲肠长度、穿刺针粗细、穿刺孔数量决定：

• 轻度 CLP：结扎盲肠 1/3 长度，单孔穿刺；生存率高，炎症温和；

• 中度 CLP（最常用）：结扎盲肠 50% 长度，2 针穿刺；72h 存在一定死亡率；

• 重度 CLP：结扎盲肠 2/3，三针穿刺，死亡率高，多用于休克研究。 假手术组：打开腹腔翻动盲肠，不结扎不穿刺。

二、标准手术流程

1. 小鼠麻醉，腹部备皮消毒，腹正中切口；

2. 轻柔取出盲肠，分离盲肠系膜血管，避免大出血；

3. 丝线结扎预设长度盲肠，结扎远端盲肠用无菌针头穿刺；

4. 轻轻挤压盲肠，少量肠内容物从穿刺孔溢出；

5. 盲肠放回腹腔，缝合关腹；

6. 术后补液支持（生理盐水皮下补液），可以按需镇痛，提升动物耐受。

三、CLP 模型评价指标

1. 一般指标：7d 生存曲线、体温、活动度、皮毛状态；

2. 外周炎症因子：TNF-α、IL-6、IL-1β（血清 ELISA）；

3. 器官损伤：肝、肺、肾组织病理，血清 ALT、AST、BUN；

4. 腹腔细菌载量：腹腔灌洗液涂布计数。

四、常见造模翻车原因

• 穿刺之后没有粪便溢出：炎症弱，成模失败；

• 短时间大批量死亡：结扎过多、穿刺过重、没有术后补液；

• 组间差异巨大：每只小鼠盲肠大小不一样，统一标准化结扎比例，而不是固定长度。

五、实验设计提示

CLP 模型适合研究脓毒症炎症风暴、器官保护、抗菌 / 抗炎药物。药物干预时机分为预防性给药（术前）、治疗性给药（造模后数小时，模拟临床发病后给药）。

研录生物可承接CLP 盲肠结扎穿刺脓毒症小鼠模型，支持轻中重度分级造模、生存曲线记录、炎症因子检测、多器官病理分析。