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大鼠胃Cajal间质细胞

大鼠胃Cajal间质细胞分布于胃肠道肌层之间,是胃肠道慢波活动的起搏细胞,与胃肠动力性疾病密切相关,用于消化生理研究。
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详情介绍

大鼠胃Cajal间质细胞分离培养及鉴定

 


【材料】

成年大鼠、手术剪、手术镊、75%酒精、双抗、两性霉素、FBS、培养皿、15ml离心管、M199、PBS、D-Hanks、酶消化液(0.1%II型胶原酶、ATP、胰蛋白酶抑制、SCF(干细胞生长因子)、Ficoll 400;)


【方法】

1)处死大鼠,取胃窦组织,去除粘膜层和粘膜上皮D-Hanks清洗。

2)将胃肌条组织剪成1mm×1mm×1mm组织碎片,加入酶液消化60min。

3)消化液浑浊后终止消化,过200目细胞网筛,1000rpm,10min离心,去上清。沉淀重复离心2次。

4)加入Ficoll 400,梯度分离,纯化细胞。

4)细胞沉淀种明胶包被的培养皿中,48h换液。


【鉴定】

免疫荧光:阳性:c-kit

 



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