肿瘤浸润淋巴细胞 TIL 细胞疗法的临床研究与工艺优化

CAR‑T 细胞疗法在血液系统恶性肿瘤取得重大突破，但是面对实体瘤治疗效果有限。实体瘤复杂的免疫抑制微环境、肿瘤抗原异质性、T 细胞浸润障碍，成为 CAR‑T 攻克实体瘤的多重阻碍。TIL 肿瘤浸润淋巴细胞疗法，是实体瘤过继细胞治疗当中极具潜力的技术路线。TIL 细胞是天然存在于患者肿瘤病灶内部的淋巴细胞，这些 T 细胞本身就具备识别患者自身肿瘤新抗原的能力，只是在肿瘤微环境当中被抑制，无法充分发挥杀伤功能。

TIL 完整的治疗流程分为几个关键步骤。首先需要获取患者的肿瘤组织样本，一般通过手术切除或者穿刺取样；之后在实验室中将肿瘤组织剪碎，分离提取出肿瘤内部浸润的淋巴细胞。第一步是初始培养，在高浓度白介素‑2 条件下，刺激 TIL 细胞从肿瘤组织当中生长出来；随后开展扩增阶段，利用细胞因子、抗原刺激，实现 TIL 细胞大规模体外扩增，获得数量足够的细胞产品。回输之前，患者需要接受淋巴清除预处理，清除体内免疫抑制细胞，为回输 TIL 细胞体内存活增殖创造条件，最后将大量扩增完成的 TIL 细胞回输到患者身体，依靠 TIL 识别杀伤肿瘤细胞。

和 CAR‑T 技术相比较，TIL 不需要对细胞进行基因编辑改造，利用患者自身天然抗肿瘤 T 细胞；一份 TIL 细胞产品当中，包含大量识别不同肿瘤新抗原的 T 细胞克隆，可以靶向肿瘤多种突变抗原，能够应对肿瘤的抗原异质性，降低肿瘤因为抗原丢失产生治疗逃逸的概率。目前已经有多项临床研究数据，晚期黑色素瘤接受 TIL 治疗，不少多次治疗失败的晚期患者实现肿瘤持久缓解。宫颈癌、头颈部肿瘤、非小细胞肺癌、胆管癌等实体瘤的临床试验也在陆续开展。

但是 TIL 疗法的普及，面临重重现实阻碍。第一，原料依赖肿瘤组织标本，如果患者没有可获取的实体肿瘤组织，就无法开展 TIL 制备；部分晚期患者肿瘤组织当中淋巴细胞数量稀少，分离之后无法成功扩增，直接造成制备失败。第二，体外工艺难度高，TIL 原代细胞培养周期长，培养流程复杂，不同患者样本差异巨大，很难标准化生产。第三，回输之后 TIL 细胞体内存活时间有限，肿瘤微环境依旧存在很强免疫抑制，回输之后 T 细胞容易耗竭，限制体内抗肿瘤效果。

行业内正在从多个维度做工艺和技术改良。一方面优化体外培养扩增体系，优化细胞因子组合，筛选培养基配方，减少 T 细胞体外培养过程的耗竭，保留 T 细胞记忆表型；另一方面开发基因编辑修饰 TIL，敲除抑制性受体，抵抗肿瘤微环境的免疫抑制；同时探索 TIL 与免疫检查点抑制剂联合用药，解除体内免疫抑制，提升回输之后 TIL 细胞在体内的存活和杀伤能力。

另外自动化封闭式细胞制备工艺开发，也是产业化重点。传统 TIL 制备依赖人工操作，成本高昂，自动化设备可以降低人为操作误差，推动工艺标准化，降低生产成本。与此同时，行业也在完善 TIL 细胞产品质量评价标准，对细胞活率、细胞表型、杀伤功能、无菌质控建立完整检测体系。

总体来看，TIL 细胞疗法为晚期实体瘤带来全新治疗希望，但样本来源、制备工艺、体内耗竭等问题还需要持续攻克。随着培养工艺迭代、联合治疗方案完善，TIL 细胞治疗有望惠及更多实体瘤患者。