成骨诱导培养基

间充质干细胞成骨诱导培养基

诱导成骨（以12孔板为例）

1、将传代或复苏冻存的间充质干细胞接种到12孔板上，置于37℃，5% CO2 培养箱中培养；当间充质干细胞融合度达到80-90%时，开始诱导成骨前体细胞分化。吸掉间充质干细胞培养基，每孔 加500ulPBS清洗一次，吸掉PBS，加入1 ml细胞诱导成骨分化培养基。

2、2~3天更换新鲜成骨诱导培养基。

3、诱导7天后，观察细胞的形态变化及生长情况

成骨检测染液染色

1、成骨诱导分化结束后，吸走12孔板中的培养基，用1×PBS冲洗1-2次。每孔加入500ul 4%多聚甲醛，固定10 min。

2、吸走细胞固定液，用1×PBS冲洗2次，每孔中加入1 mL成骨检测染色液室温染色15min。

3、吸走成骨染液，用1×PBS冲洗2-3次。

4、将培养板置于显微镜下观察成骨染色效果，拍照。