小鼠胰腺上皮细胞有保护、吸收、分泌功能,参与胰岛素、胰高血糖素分泌调节,适合胰腺生理、糖代谢相关体外模型研究。
小鼠胰腺上皮细胞的分离培养及鉴定
【材料】
动物:2-20周龄C57BL/6J小鼠;
器械耗材:手术剪、手术镊、 15ml离心管试剂、75%酒精、DMEM、双抗、PBS、胶原酶、胰蛋白酶、上皮专用培养液;
【方法】
胶原酶联合胰酶消化法
1)鼠脱颈,取出胰腺组织,剪碎,PBS清洗;
2)组织碎块加入混合酶进行消化,组织消化完后收集细胞悬液;
3)细胞悬液离心,收集沉淀,再用PBS重悬离心;
4)上皮专用培养液种细胞,37℃,5co2,48小时首换液;
【培养】
上皮细胞专用培养液;
【鉴定】
免疫荧光阳性:角蛋白18(Cytokeratin 18)


