抑郁模型构建方法
【目的】
大、小鼠抑郁模型的建立
【方法】
1、大、小鼠适应性喂养 7 天后,运用慢性不可预知性应激结合孤养的方式制作抑郁模型。
2、每笼饲养 1 只并接受各种不同的应激刺激,包括断水 24h,断食 24h,夹尾 1min,10℃冰水游泳5min,摇晃(1 次/s,持续 5min),昼夜颠倒,束缚 2h。
3、每天随机选择 1 种刺激,每种刺激平均使用 4 次,每天连续刺激,造模时间为4-5周。
①断水:从早上 9 点开始断水,至次日早上 9 点结束断水。
②断食:从早上 9 点开始断食,至次日早上 9 点结束断食。
③冰水游泳:将冰水注入水箱,水深约 30cm,防止小鼠游泳时找到支撑,水位距箱顶约 30cm,防止小鼠游泳时逃脱,加入冰袋,温度计观察水温至10℃开始放入称量体重后的老鼠(游泳过程中随时监测调节水温)。计时 5min 后,取出小鼠,擦干放入笼内。
④昼夜颠倒:于早上 9 点关照明灯,至晚上 7 点开启照明灯。
⑤夹尾:束缚布包裹老鼠后,止血钳钳夹鼠尾末梢 1/3 处,持续1min后放开。
⑥束缚:束缚布包裹老鼠限制活动 2h,于上午 10 点到 12 点进行。
⑦摇晃:将老鼠用标签纸编号后,依次放入隔间内,操作者摇晃老鼠(类似钟摆),频率为 1 次/s,计时 5min,摇晃完成后按编号放入笼内。
【行为学检测】
1、模型结束后对所有动物进行行为学评价:
旷场实验和1%蔗糖水偏好实验(1% sucrose preference test,1%SPT)测定,处理前后若数据具有统计学差异(P<0>
2、行为学检测指标:
体重(0、7d、14d、21d、28d)、糖水偏爱测试(0、7d、14d、21d、28d)和旷场测试(1、28d,穿越格数、直立次数、中央格停留时间、进入中央区域次数)
