FeCl2诱导大、小鼠动脉血栓模型的建立

FeCl2诱导大、小鼠动脉血栓模型的建立

【简介】

脊椎动物的凝血系统对于维持自身封闭的高压循环系统是至关重要的。血管损伤时，需要凝血因子激活才能有效的止血。原发性止血是由血管损伤部位的血小板的聚集和激活引起的。在继发性止血过程中，凝血因子的激活通过不溶性纤维蛋白网络的沉积来增强血小板堵塞。然而，凝血功能的异常激活可导致血管内血凝块的形成，从而形成病理血栓性疾病，如心肌梗死、中风和静脉血栓栓塞等。

血管内皮的损伤，是血栓形成的最重要和最常见的原因。 内皮细胞的损伤，暴露了内皮下的胶原纤维，激活血小板和凝血因子Ⅻ，启动了内源性凝血系统。损伤的内皮细胞释放组织因子，激活凝血因子Ⅶ，启动外源性凝血系统。在触发凝血过程中起重要作用的是血小板的活化。血小板粘集，血小板与纤维蛋白和纤维连接蛋白粘附，促使血小板彼此粘集成堆。

【目的】

氯化亚铁诱导大鼠动脉血栓模型的建立

【方法】

A方法：

1、小鼠麻醉，仰卧位固定，颈部脱毛备皮；

2、沿颈部正中剪开皮肤，长度约2cm，钝性剥离单侧颈动脉肌肉，暴露颈动脉；

3、颈动脉外敷氯化亚铁（FeCl2）溶液20min ；

4、外敷结束后生理盐水清理创口，缝合皮肤，观察饲养。

B方法：

1、SD大鼠麻醉，仰卧位固定，左后肢脱毛备皮；

2、沿股动脉剪开皮肤，长度约2cm，暴露股动脉；

3、股动脉上外敷氯化亚铁（FeCl2）溶液20min ；

4、外敷结束后生理盐水清理创口，缝合皮肤，观察饲养。

注：血管局部应用FeCl2溶液后，铁离子进入血管腔，由高价铁离子的氧化作用导致内皮损伤引起血小板激活、黏附、集聚，进而形成血栓。

阳性对照组先在颈部区域皮下注射800U/kg肝素钠溶液，30min后，再用FeCl2溶液在股动脉上外敷20min。肝素钠能干扰血凝过程的许多环节，在体内外都有抗凝血作用。涉及阻止血小板凝集和破坏、妨碍凝血激活酶的形成、阻止凝血酶原变为凝血酶，抑制凝血酶，从而妨碍纤维蛋白原变成纤维蛋白发挥抗凝作用。

【检测】

1、动物血清中IL-1β、TNF-α含量；

2、股动脉病理学HE染色

3、Western Blot(Hif-1α)

小鼠血清中IL-1β的含量：

在D3、D7和D31时，与Model组相比，Sham组与肝素钠组血清中IL-1β的含量明显降低，有极显著差异；在D31时，与Model组相比，Sham组与肝素钠组血清中IL-1β的含量降低，差异显著。

小鼠血清中TNF-α的含量：

在D3、D7和D31时，与Model组相比，Sham组与肝素钠组血清中TNF-α的含量明显降低，有极显著差异；在D31时，与Model组相比，Sham组与肝素钠组血清中TNF-α的含量降低，差异显著。